ОРИГИНАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

Оценка терапевтического потенциала РНК-интерференции интерстициальной коллагеназы для лечения псориаза

Ю. А. Могулевцева1, А. В. Мезенцев2, С. А. Брускин2
Информация об авторах

1 Российский государственный аграрный университет–МСХА имени К. А. Тимирязева, Москва

2 Лаборатория функциональной геномики, отдел генетических основ биотехнологии,
Институт общей генетики имени Н. И. Вавилова РАН, Москва

Для корреспонденции: Мезенцев Александр Викторович
ул. Губкина, д. 3, г. Москва, 119333; ur.ggiv@vestnesem

Информация о статье

Благодарности: авторы благодарят проф. Элеонору Пирузян (Институт общей генетики имени Н. И. Вавилова РАН) за критический анализ текста рукописи и проф. Марию Лагарькову (Институт общей генетики имени Н. И. Вавилова РАН) — за предоставление необходимых для работы плазмид.

Авторы внесли равный вклад в получение, обработку и обсуждение экспериментальных данных. Иллюстрации подготовлены Ю. А. Могулевцевой, черновик рукописи — А. В. Мезенцевым. Все авторы принимали участие во внесении исправлений в текст рукописи.

Статья получена: 17.02.2017 Статья принята к печати: 25.03.2017
|

Матриксные металлопротеиназы играют важную роль в поддержании гомеостаза кожи, заживлении ран и инициации воспалительного процесса. При псориазе матриксные металлопротеиназы участвуют в структурных перестройках эпидермиса и регуляции проницаемости микрокапилляров дермы, способствуя инфильтрации кожи клетками иммунной системы. В силу этого умение контролировать активность матриксных металлопротеиназ представляется необходимым для успешного лечения псориаза. Целью данной работы являлась оценка возможных изменений в патогенезе псориаза в результате РНК-интерференции интерстициальной коллагеназы в эпидермальных кератиноцитах. Для этого клетки трансдуцировали лентивирусными частицами, кодирующими в геноме малую интерферирующую РНК. Для анализа уровней экспрессии генов использовали метод полимеразной цепной реакции в режиме «реального времени». Ферментативную активность определяли методом зимографии. Согласно полученным результатам РНК-интерференция привела к снижению уровня экспрессии гена и ферментативной активности интерстициальной коллагеназы в 20 и 4 раза соответственно. При этом экспрессия гомологичных генов (MMP2, -9 и -12) менялась незначительно. Напротив, нами были показаны изменения в уровнях экспрессии генов цитокератинов (KRT1: 16,89 ± 0,97; KRT14: 2,36 ± 0,19; KRT17: 0,12 ± 0,01; KRT18: 0,56 ± 0,02), инволюкрина (0,79 ± 0,11) и филаггрина (6.99 ± 0,97). Помимо этого, РНК-интерференция вызвала существенное снижение скорости миграции клеток, хотя практически не повлияла на их пролиферацию. Таким образом, терапевтический потенциал малых интерферирующих РНК, специфичных к интерстициальной коллагеназе, заключается в нормализации экспрессии важных для патогенеза псориаза генов (IVL, FLG, KRT1, -14 -17 и -18).

Ключевые слова: малые интерферирующие РНК, псориаз, интерстициальная коллагеназа, лентивирусы, трансдукция, трансфекция, цитокератины, инволюкрин, филаггрин

КОММЕНТАРИИ (0)