ОРИГИНАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

Экспериментальные подходы к таргетному редактированию гена CFTR с помощью CRISPR-Cas9

С. А. Смирнихина1, А. А. Анучина1, К. С. Кочергин-Никитский1, Э. П. Адильгереева1, В. Д. Якушина1, А. В. Лавров1,2
Информация об авторах

1 Лаборатория мутагенеза,
Медико-генетический научный центр, Москва

2 Кафедра молекулярной и клеточной генетики, медико-биологический факультет,
Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н. И. Пирогова, Москва

Для корреспонденции: Светлана Анатольевна Смирнихина
ул. Москворечье, д. 1, г. Москва, 115522; moc.liamg@sanihkinrims

Информация о статье

Финансирование: раздел «Редактирование CFTR локуса» поддержан грантом РНФ (Соглашение № 17-75-20095), разделы «Увеличение экспрессии направляющих РНК» и «Увеличение эффективности редактирования CFTR локуса» поддержаны Российской академией наук и государственным заданием ФГБНУ «МГНЦ».

Статья получена: 15.03.2018 Статья принята к печати: 20.03.2018 Опубликовано online: 04.07.2018
|
Рис. 1. Карты полученных плазмид для геномного редактирования локуса CFTR мутации F508del
Рис. 2. Используемые в работе sgRNA на локус CFTR
Рис. 3. Сравнение эффективности редактирования CFTR и EGFP в культуре HEK293T через 48–72 ч после трансфекции. Данные представлены как среднее значение со стандартной ошибкой среднего
Рис. 4. Сравнение эффективности редактирования CFTR в культуре HEK293T. Данные представлены как среднее значение
Рис. 5. Сравнение эффективности редактирования CFTR и EGFP в культуре HEK293T с использованием sgRNA, экспрессирующихся со стандартного промотора U6 и с гибридного промотора U6-tRNAgln (плазмиды HP). Данные представлены как среднее значение
Рис. 6. Сравнение эффективности редактирования CFTR в культуре HEK293T с использованием модифицированных sgRNA. Данные представлены как среднее значение
Таблица. Сравнение эффективности редактирования гена CFTR при разных условиях культивирования трансфицированных клеток HEK293T