ISSN Print 2070–7320
ISSN Online 2070–7339
Вестник РГМУ
НАУЧНЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ ЖУРНАЛ РНИМУ ИМЕНИ Н. И. ПИРОГОВА
ОРИГИНАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ
Использование комбинации рибосомного и фагового дисплеев для быстрого отбора высокоаффинных VHH-фрагментов антител альпак
Информация об авторах
Институт биоорганической химии имени М. М. Шемякина и Ю. А. Овчинникова, Москва, Россия
Для корреспонденции: Степан Петрович Чумаков
ул. Миклухо-Маклая, 16/10, г. Москва, 117997; moc.liamg@lukhtah
Информация о статье
Финансирование: работа выполнена при финансовой поддержке Министерства образования и науки РФ, уникальный код проекта RFMEFI60716X0156.
Информация о вкладе авторов: Ю. Е. Кравченко выделяла генетический материал альпак, готовила РНК, проводила ИФА; С. В. Иванов конструировал библиотеки VHH-фрагментов антител, проводил селекцию методом фагового дисплея; Д. С. Кравченко нарабатывал белковые препараты, работал с эукариотическими клеточными культурами; Е. И. Фролова планировала исследование, проводила иммунизацию животных, редактировала рукопись; С. П. Чумаков планировал исследование, проводил селекцию методом рибосомного дисплея, анализировал результаты, писал рукопись.
Статья получена: 08.12.2018
Статья принята к печати: 22.12.2018
Опубликовано online: 25.02.2019
|
Рис. 1. Схема проведения селекции с последовательным использованием методов рибосомного и фагового дисплеев
Рис. 2. Обогащение библиотек VHH-фрагментов в ходе селекции методом рибосомного дисплея (А); методом фагового дисплея (Б); при комбинировании рибосомного и фагового дисплеев (В). Сравнение обогащения всеми тремя методами для библиотеки VHH3 (Г)
Рис. 3. Сравнение способности пяти отобранных вариантов VHH-фрагментов специфически окрашивать PDLIM4 в реакции ИФА
Таблица 1. Последовательности праймеров, использованных для амплификации VHH-фрагментов
