DOI: 10.24075/vrgmu.2019.043

ОРИГИНАЛЬНОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ

Методы измерения концентрации ДНК: совпадение относительных величин и различия абсолютных

Информация об авторах

1 Институт общей генетики имени Н. И. Вавилова, Москва, Россия

2 Медико-генетический научный центр, Москва, Россия

3 Биобанк Северной Евразии, Москва, Россия

Для корреспонденции: Олег Павлович Балановский
ул. Губкина, д. 3, г. Москва, 119991; ur.xobni@yksvonalab

Информация о статье

Финансирование: исследование выполнено в рамках Государственного задания для Медико-генетического научного центра (эксперимент 1) и при поддержке гранта РНФ 17-14-01345 (эксперимент 2).

Вклад авторов в работу: О. П. Балановский — дизайн исследования, анализ данных, написание текста статьи; Ж. А. Кагазежева — проведение экспериментальных работ; М. В. Олькова — проведение экспериментальных работ, подбор литературы.

Статья получена: 21.06.2019 Статья принята к печати: 27.06.2019 Опубликовано online: 30.06.2019
|

Измерение концентрации ДНК является базовым методом, от надежности которого зависит эффективность дальнейшего хранения и использования образцов. Существует несколько широко распространенных и хорошо зарекомендовавших себя способов измерения концентрации ДНК, однако степень их согласованности друг с другом изучена недостаточно. Целью работы было измерить концентрации одних и тех же образцов разными методами и провести сравнительный анализ полученных результатов. В двух независимых экспериментах, суммарно включивших 100 образцов геномной ДНК, сравнивали три метода определения концентрации ДНК: спектрофотометрический (Nanodrop), флуориметрический (Qubit) и ПЦР в реальном времени (Quantifiler). Выявлено, что значения концентрации ДНК, полученные разными методами, хорошо коррелируют друг с другом (коэффициенты корреляции составляют 0,98–0,99). Однако при такой отличной корреляции относительных величин концентрации абсолютные величины, полученные разными методами, варьируют значительно, вплоть до двукратных различий. Спектрофотометрический метод дает наиболее высокие концентрации, ПЦР в реальном времени — промежуточные, а флуориметрический — наиболее низкие. Различия в результатах более выражены для образцов с низкой концентрацией. Мы рекомендуем учитывать наличие этих систематических различий между результатами измерения концентрации ДНК, полученными разными методами.

Ключевые слова: концентрация ДНК, методы измерения, ПЦР в реальном времени, спектрофотометрический метод, флуориметрический метод

КОММЕНТАРИИ (0)